服务介绍：

羟自由基清除率检测试剂盒(Fenton微板法)又称羟自由基清除能力检测试剂盒或羟自由基检测试剂盒，其检测原理是H₂O₂/Fe²⁺ 通过Fenton反应产生羟自由基，并将Fe²⁺氧化为Fe³⁺，导致红色的邻二氮菲-Fe²⁺氧化为无色的邻二氮菲-Fe³⁺，使邻二氮菲-Fe²⁺在536nm处的最大吸收峰消失，可通过酶标仪测定530~540nm处吸光度的变化，据此可计算出羟自由基的含量变化，即可计算出样品的羟自由基清除率或清除能力，主要用于植物组织、血清、血浆等样本。

实验流程：

1、准备样品：

①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取，按1~1.5g样品：4.5ml 蒸馏水的比例匀浆或研磨，室温静置4h，离心取上清

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可用于该试剂盒的测定

③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的羟自由基，可用蒸馏水进行恰当的稀释。

2、?OH加样：按照下表设置空白管、未损伤管、损伤管、对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，然后，置各管于37℃水浴锅保温1h；如果样品中的羟自由基(?OH)浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行管。

?OH测定：取96孔板，将各管溶液依次吸取250ul加至96孔板中，用酶标仪检测530~540nm处各孔吸光度值，依次记为A₀、A₁、A₂、A₃`、A₃。

实验结果：

全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。

送样运输要求：

1、动植物组织样本(干冰运输)

准确称取动物组织重量按重量(mg)：体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水)，冰水浴条件下，机械匀浆，制备成10%的匀浆液，2500~3000转/分钟，离心10分钟，取上清液进行测定。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜（GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清）后于2-8℃ 3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

3、血浆样本(干冰运输)

可用肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

4、细胞样本

贴壁细胞：将细胞用PBS冲洗2次后，用细胞刮将细胞小心刮下来，将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

悬浮细胞：将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

细胞上清：标本于2-8℃，3000转/分离心15min取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！