服务介绍：

    还原糖检测试剂盒(斐林比色法)主要由酒石酸钠钾、硫酸铜等组成，其测定原理是还原糖具有醛基和酮基，在碱性溶液中煮沸能把斐林试剂中的Cu2+还原成Cu+，使蓝色的斐林试剂脱色，脱色程度与溶液中还原糖含量成正比，在590nm下可用比色法测定吸光度，查标准曲线即可计算出样品中还原糖的含量，主要用于含淀粉食品、酒精饮料、碳酸饮料、肉制品、蜜饯等食品和植物等样品中还原糖的定量检测，总糖的含量也可以测定，但需要提前水解后才能检测，也可用于还原糖的定性试验。

实验流程：

1、配置斐林试剂。

2、配置pH中和液(1×)。

3、样品中还原糖的提取：

1)固体样品(如含淀粉食品、植物样品等)：称取粉碎或混匀后的试样10~20g（精确到0.01g），置于250ml容量瓶，当体积接近150ml时滴加1~3滴甲基红指示剂，如呈红色可用pH中和液调至微黄色；若用风干样品，可称取3g直接加入容量瓶，加入少量水湿润后再加水至150ml左右加入指示剂和中和液；将容量瓶置于80℃的恒温水浴中保温30min，期间摇动数次，以便将还原糖充分提取出来。

2)酒精饮料：称取混匀后的试样100g(精确到0.1g），置于蒸发皿上，滴加1~3滴甲基红指示剂，用pH中和液调至微黄色，在水浴上蒸发至原体积的1/4后，移入250ml容量瓶，置于80℃的恒温水浴中保温30min，期间摇动数次。

3)碳酸饮料：称取混匀后的试样100g(精确到0.1g），置于蒸发皿上，在水浴上微微搅拌除去二氧化碳后，移入250容量瓶，用水洗涤蒸发皿并入容量瓶，加水至刻度，混匀后备用。

4)总糖的水解和提取：称取植物样品0.5~3g，剪碎，加入蒸馏水约3ml匀浆，转移至三角烧瓶，用12ml蒸馏水冲洗研磨器2~3次，冲洗液也转移至烧瓶中，向三角烧瓶中加入10ml  6M盐酸溶液，摇匀，煮沸30min，并不时搅拌；取2滴加于小离心管，再滴加1滴碘液，检查水解是否完全，如已经水解完全，则不显示蓝色；水解完毕后冷却至室温，滴加6M氢氧化钠溶液，使溶液pH接近中性；含蛋白质较多的样品参考上述方法，滤液或上清液用蒸馏水定容至100ml，混匀，取10ml，用蒸馏水定容至100ml，摇匀备用。

3、制作还原糖标准曲线：按下表设置空白管(0号)、梯度标准管(1~6号)，按顺序依次加入。

将各管混匀后，用沸水浴加热15min，冷水或自来水冷却，2500r/min离心5~10min，取上清，1cm比色皿，空白管调零，用分光光度计测590nm的吸光度值，以各标准管吸光度为纵坐标、对应葡萄糖含量为横坐标，绘制标准曲线。

4、样品还原糖的测定：吸取准备好的还原糖提取液3ml，加入2ml斐林试剂，混匀，沸水浴加热15min，冷却、离心、取上清、测定等操作同标准曲线，空白管调零后用样品管的吸光度值带入回归方程即可计算出样品中还原糖的含量。

 实验结果：全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。

鉴定结果：

还原性糖(如核糖、葡萄糖、果糖等)呈砖红色沉淀，非还原性糖(蔗糖、淀粉等)无颜色变化。

送样运输要求：

植物样本干冰运输，食品样本具体以食物存储方式运输。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！