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手动生化

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葡萄糖(检测服务)

葡萄糖(Glucose, Dextrose,Glu)又称玉米葡糖,简称葡糖,化学式C6H12O6,分子量为180.16,是自然界分布最广、最重要的一种单糖,属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法,最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法,上述酶学法特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪,测定葡萄糖亦可通过邻甲苯胺法、苯胺法、联苯胺法等实现。

价格:¥20.00

规格:反应

货号:ST1535

品牌:LEAGENE

服务介绍:

    葡萄糖(Glucose, Dextrose,Glu)又称玉米葡糖,简称葡糖,化学式C6H12O6,分子量为180.16,是自然界分布最广、最重要的一种单糖,属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法,最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法,上述酶学法特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪,测定葡萄糖亦可通过邻甲苯胺法、苯胺法、联苯胺法等实现。

货号

名称

规格

价格

ST1535

葡萄糖检测试剂盒

反应

20

实验流程:

样本处理:

①血清、血浆、脑脊液样品:从待测样品中分离出的血清或血浆不应有溶血,直接测定,如超过线性范围(30mmol/L),用生理盐水或PBS稀释后测定。

细胞样品:

a.取适量的细胞(一般推荐>106以上),1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。

b.用PBS或生理盐水清洗1~2次,1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。

c.加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5次;亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心;亦可用1~2% Triton X-100冰浴30~60min,制备好的裂解液不可离心。

③组织样品:准确称取适量组织样品,按质量(g):生理盐水或PBS(ml)=1:9的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆,2500~3000g离心10min,取上清。

Glu测定:

酶标仪、全自动生化分析仪Glu测定

加入物(μl)

空白孔

标准孔

测定孔

ddH2O

3

Glu标准(5mmol/L)

3

待测样品

3

GOD-POD工作液

300

300

300

 

分光光度计(1ml比色杯)、半自动生化分析仪Glu测定

加入物(ml)

空白管

标准管

测定管

ddH2O

0.01

Glu标准(5mmol/L)

0.01

待测样品

0.01

GOD-POD工作液

1

1

1

 

普通分光光度计(2ml比色杯)Glu测定

加入物(ml)

空白管

标准管

测定管

ddH2O

0.02

Glu标准(5mmol/L)

0.02

待测样品

0.02

GOD-POD工作液

2

2

2

   各种仪器按上表依次加入试剂。

充分混匀, 37℃水浴中孵育15min。

③立即用相应仪器测定505nm处吸光度,以空白孔(管)调零,读取标准孔(管)、测定孔(管)的吸光度,分别记为A标准A测定

机器参数:

主波长

505nm

反应类型

终点法

反应方向

升反应(+)

 

实验结果:全自动生化仪检测后导出结果,结果由EXCEL形式发送。

送样运输要求:

1、动植物组织样本(干冰运输)

准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜(GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清)后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

3、血浆样本(干冰运输)

可用肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

4、细胞样本

贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。

仅供科研用途,不可用于临床诊断!