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手动生化

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植物根系活力(检测服务)

测定植物根系活力时,以TTC为底物,保温1~4小时,根系中脱氢酶能够还原TTC并生成不溶于水的红色TTF,再用有机溶剂(乙酸乙酯或丙酮等)将其从根中提取出来,用分光光度计或酶标仪检测485nm处吸光度,进而计算出TTC的还原量,以该还原量表示脱氢酶活性,并作为植物根系活力的指标,该试剂盒主要用于定量测定植物的根系活力或脱氢酶活性。

价格:¥15.00

规格:反应

货号:ST1515

品牌:LEAGENE

服务介绍:

       测定植物根系活力时,以TTC为底物,保温1~4小时,根系中脱氢酶能够还原TTC并生成不溶于水的红色TTF,再用有机溶剂(乙酸乙酯或丙酮等)将其从根中提取出来,用分光光度计或酶标仪检测485nm处吸光度,进而计算出TTC的还原量,以该还原量表示脱氢酶活性,并作为植物根系活力的指标,该试剂盒主要用于定量测定植物的根系活力或脱氢酶活性。

货号

名称

规格

价格

ST1515

植物根系活力检测试剂盒

反应

15

实验结果展示:

实验流程:

1. 检测准备工作:

1.1. TTF系列标准管配制:根据需要,进行梯度稀释(例如稀释至25、50、100、150、200、400μg),与待测样品进行后续检测后,用于标准曲线法数据分析;

1.2.准备样品:取0.2~0.5g植物须根系,洗净,用滤纸吸干,完全浸没于TTC Assay buffer工作液中,37℃避光孵育1~3h,加入2ml TTC终止液终止反应;同时做一空白对照实验,即根系先完全浸没于2ml TTC终止液以杀死根样,再加入10ml TTC Assay Buffer工作液,37℃避光孵育1~3h。取出充分研磨或匀浆,以提取出TTF,把红色提取液(TTF)转移至离心管,并用少量乙酸乙酯把残渣洗涤2~3次,再将洗涤液一并转移至离心管,最后补加乙酸乙酯至10ml,摇匀。

1.3测定:比色杯光径1.0cm,系列标准管以“0”号管调零,测定1~5号管485nm的吸光度值;样品管以空白对照组样品提取液做参比,调零,以分光光度计或酶标仪测定实验组样品提取液在485nm的吸光度值。

实验结果:全自动生化仪检测后导出结果,结果由EXCEL形式发送。

送样运输要求:

1、动植物组织样本(干冰运输)

准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜(GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清)后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

3、血浆样本(干冰运输)

可用肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

4、细胞样本

贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。

仅供科研用途,不可用于临床诊断!