超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)又称超氧阴离子产生速率检测试剂盒，其检测原理是在酸性条件下，2份O2-与羟胺反应生成1份NO2-，NO2-在对氨基苯磺酸和萘胺的作用下反应生成粉红色的偶氮物质，以分光光度计测定530nm处吸光度，在一定范围内颜色深浅与O2-成正比，根据A530及NO2-和O2-的相关反应中物质的量的关系，可算出样品中O2-的浓度，主要用于测定植物组织中的超氧阴离子自由基含量或超氧阴离子的产生速率及清除能力。
价格：￥15.00
规格：反应
货号：ST1500
品牌：LEAGENE
服务介绍：
超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)又称超氧阴离子产生速率检测试剂盒，其检测原理是在酸性条件下，2份O2-与羟胺反应生成1份NO2-，NO2-在对氨基苯磺酸和萘胺的作用下反应生成粉红色的偶氮物质，以分光光度计测定530nm处吸光度，在一定范围内颜色深浅与O2-成正比，根据A530及NO2-和O2-的相关反应中物质的量的关系，可算出样品中O2-的浓度，主要用于测定植物组织中的超氧阴离子自由基含量或超氧阴离子的产生速率及清除能力。
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
ST1500 | 超氧阴离子自由基检测试剂盒 | 反应 | 15元 |
实验流程：
1、 准备样品：
①植物样品：取正常或逆境下的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取1~1.5g，加入2ml预冷的O2- Lysis Buffer后冰浴条件下匀浆或研磨，4℃ 10000g离心10min，上清液即为超氧阴离子自由基提取液，4℃保存备用。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可直接用于该试剂盒的测定
③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的超氧阴离子自由基，可以使用O2- Lysis Buffer进行恰当的稀释。
2、 配制系列NO2-标准溶液：以NO2-标准(1mM)按下表继续稀释：
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
NO2-标准(1mM) | 0.01 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.05 | 0.06 |
蒸馏水 | 0.99 | 0.98 | 0.97 | 0.96 | 0.95 | 0.94 |
NO2-含量(μM) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 |
3、 O2-加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
蒸馏水 | 1 | — | — |
系列NO2-标准(1~6号) | — | 1 | — |
待测样品 | — | — | 0.25 |
O2- Lysis Buffer | — | — | 0.25 |
羟胺溶液 | — | — | 0.5 |
混匀，25℃水浴孵育20min。 | |||
氨基苯磺酸显色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
萘胺显色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
混匀，30℃水浴孵育30min。 | |||
4、O2-测定：以空白调零，比色杯光径1cm，分光光度计测定标准管、测定管530nm处吸光度(即为A标准、A测定)。
实验结果：
全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。
送样运输要求：
1、动植物组织样本(干冰运输)
准确称取动物组织重量按重量(mg)：体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水)，冰水浴条件下，机械匀浆，制备成10%的匀浆液，2500~3000转/分钟，离心10分钟，取上清液进行测定。
2、血清样本(干冰运输)
全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜（GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清）后于2-8℃ 3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。
3、血浆样本(干冰运输)
可用肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。
4、细胞样本
贴壁细胞：将细胞用PBS冲洗2次后，用细胞刮将细胞小心刮下来，将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。
悬浮细胞：将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。
细胞上清：标本于2-8℃，3000转/分离心15min取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。
仅供科研用途，不可用于临床诊断！
