服务介绍：

总谷胱甘肽(T-GSH)的试剂盒，其检测原理是谷胱甘肽还原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(GSH)，由GSSG还原成的GSH和样品本身含有的GSH都与发色底物DTNB反应，生成黄色的TNB和GSSG，前后两个反应合并起来，总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个呈色的限速反应，总谷胱甘肽(T-GSH)含量决定了黄色含量，通过分光光度法(酶标仪)测定410nm处吸光度，与相应处理的GSH标准比较，获得样品的总谷胱甘肽(T-GSH)即(GSSG+GSH)含量，可用于测定血浆、血清、植物或动物组织、细胞等样品中总谷胱甘肽(T-GSH)含量。该试剂盒仅用于科研，不用于临床诊断或其他用途。

实验结果展示：

实验流程：

试剂盒：

1、样本接收：植物组织、动物组织、红细胞、血浆、细胞

2、实步骤：

(1)工作试剂的配制：还原型谷胱甘肽(GSH)标准加入ddH2O，溶解并混匀，即为还原型GSH标准储存液。DTNB中加入 DMSO，溶解并混匀，即为DTNB储存液。GSH还原酶原液：GSH Assay Buffer =1:49的比例混合，即为50×GSH还原酶。配制T-GSH检测工作液。配制蛋白沉淀工作液。配制标准品：把还原型GSH标准储存液(10mM)用蛋白沉淀工作液稀释成50μM标准溶液，然后依次稀释成25、15、10、5、2μM GSH溶液，取50、25、15、10、5、2μM GSH标准溶液6个点做标准曲线。配制NADPH工作液。

(2)按照说明书设置的表格依次加样。.

(3)全自动生化仪自动测定。

实验结果：全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。

送样运输要求：

以下所有样本必须尽量新鲜!

1.动植物组织样本(干冰运输)

准确称取动物组织重量，按重量(mg): 体积(L)=1:9 的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐 0.86% 或 0.9% 的生理水)，冰水浴条件下，机械匀浆，制备成10%的匀浆液，2500-3000r/min，离心10分钟，取上清液进行测定。

2.血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2h或4℃过夜后于 2-8℃3000r/min离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于 -20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

3.血浆样本(干冰运输)

可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30min内于2-8℃3000r/min离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

4.细胞样本

贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后，用细胞刮将细胞小心刮下来，接着将培养液3000r/min离心 10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

悬浮细胞:将培养液3000r/min离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

细胞上清:标本于2-8℃3000r/min离心15min取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20或-80保存。避免反复冻融。

5.全血样本(4℃运输)

EDTA抗凝管取适量抗凝全血时，EDTA与血液最佳比例为1.5mg:1mL，样本量不可太多或太少，取样后上下轻轻颠倒几次使血液与抗凝剂充分混匀。4℃运输，不可与冰袋直接接触，不可猛烈撞击。抗凝全血仅用于血常规检测，不可运输后再离心取血浆。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！