服务介绍：

      植物过氧化物酶(POD)检测试剂盒(愈创木酚微板法)检测原理是以愈创木酚(又称2-甲氧基酚)作为底物，在酶促反应的最适条件下采用每隔一定时间测定产物生成量的方法，于酶标仪470nm处测定吸光度，以吸光度变化所需酶量进行计算，主要用于植物组织的裂解液或匀浆液、血清等样品中内源性的过氧化物酶活性，尤其适用于测定水果中过氧化物酶活性。

实验流程：

1、 准备样品：

①植物样品：取0.5-1.0g植物组织或水果中层果肉加入4ml预冷的POD Lysis Buffer研磨或匀浆，4℃ 10000g离心15~20min，留取上清液，即为POD粗提液

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于该试剂盒的测定，-20℃冻存，用于过氧化物酶的测定。

③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要用POD Lysis Buffer进行适当匀浆，4℃ 10000g离心15~20min，留取上清液，即为POD粗提液，

④高活性样品：如果样品中含有较高活性的过氧化物酶，可以使用POD Lysis Buffer进行恰当的稀释。

2、 配制POD Assay Buffer工作液：取适量的POD氧化剂和POD Assay Buffer，按POD氧化剂：POD Assay Buffer=1：14混合，

3、 POD加样：取96孔板，按照下表设置对照孔孔、测定孔，注意：对照孔、测定孔中为同一待测样品，但对照孔中是提前加热煮沸5min的样品

 4、 POD测定：立即以酶标仪，以对照孔为对照，测定470nm处测定孔的吸光度(A测定0)；37℃准确孵育3min后，立即加入5μl POD终止液终止反应(备选方案)，以对照孔为对照，以酶标仪测定470nm处测定孔的吸光度(A测定1)。

实验结果：

全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。

送样运输要求：

1、动植物组织样本(干冰运输)

准确称取动物组织重量按重量(mg)：体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水)，冰水浴条件下，机械匀浆，制备成10%的匀浆液，2500~3000转/分钟，离心10分钟，取上清液进行测定。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜（GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清）后于2-8℃ 3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

3、血浆样本(干冰运输)

可用肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

4、细胞样本

贴壁细胞：将细胞用PBS冲洗2次后，用细胞刮将细胞小心刮下来，将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

悬浮细胞：将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

细胞上清：标本于2-8℃，3000转/分离心15min取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！