服务介绍：

        木聚糖酶能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下可以与３,５-二硝基水杨酸(DNS)试剂发生显色反应。反应液颜色的深度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中木聚糖酶的活力成正比。因此，通过测定反应液颜色的强度，可以计算反应液中木聚糖酶的活力。

实验流程：

1、准备样品:

①固体样品称取试样两份，精确至0.001 g。 加入4ml Assay buffer，充分溶解，并定容至10 ml，在4 °C条件下避光保存1~2h。1000g离心3~5min，取上清液，再用Assay buffer做适当稀释、定容(稀释后的酶液中木聚糖酶活力最好能控制在0.04~0.10U/ml之间）。

②液体样品可以直接用Assay buffer稀释、定容(稀释后的酶液中木聚糖酶活力最好能控制在 0.04~0.10 U/ml之间）

2、配制木聚糖溶液：准确称取0.15g 木聚糖，使充分溶解于8ml去离子和5ml NH水溶液(3×)中，通过pH计测定，用YS溶液调节pH至5.5~5.6，补水至15ml

2、配制NH水溶液(1×)：取1份NH水溶液(3×)和2份去离子水混合即成。

3、标准曲线绘制：取8支离心管按下表设置，准确吸取木糖标准(10mg/ml)与Assay buffer，即得不同浓度的木糖梯度标准。

取1支离心管，加入0.08mlAssay buffer和0.1mlDNS试剂，混匀，沸水浴加热5min，自来水冷却至室温，加NH水溶液(1×)0.32ml，即为空白管。另取7支离心管，加入0.04ml 37℃预热的Assay buffer、0.04ml木糖梯度标准和0.1mlDNS试剂，混匀，沸水浴加热5min，自来水冷却至室温，加NH水溶液(1×)0.32ml，即为标准管。以空白管调零，酶标仪测定540nm处各管的吸光度。

测定样品

①取适量的木聚糖溶液和酶提取液置于不同的离心管中，37°C 平衡 20 min；木聚糖溶液使用之前应充分摇匀。

②取2支离心管按下表设置依次加入相应试剂：

 以空白管调零，酶标仪测定540nm处对照管和测定管的吸光度(分别记为A₁、A₀)。

实验结果：

全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。

送样运输要求：

1、动植物组织样本(干冰运输)

准确称取动物组织重量按重量(mg)：体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水)，冰水浴条件下，机械匀浆，制备成10%的匀浆液，2500~3000转/分钟，离心10分钟，取上清液进行测定。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜（GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清）后于2-8℃ 3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

3、血浆样本(干冰运输)

可用肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

4、细胞样本

贴壁细胞：将细胞用PBS冲洗2次后，用细胞刮将细胞小心刮下来，将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

悬浮细胞：将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

细胞上清：标本于2-8℃，3000转/分离心15min取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！