植物硝态氮检测试剂盒(水杨酸比色法)检测原理是在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应生成硝基水杨酸,后者在碱性条件下呈黄色,其颜色深浅与氮含量在一定范围内呈正比,以分光光度计或酶标仪测定410nm处吸光度,根据NO3-的标准曲线即可计算出样品的硝态氮含量,该试剂盒主要用于测定植物组织中的硝态氮含量。
价格:¥15.00
规格:反应
货号:ST1465
品牌:LEAGENE
服务介绍:
植物硝态氮检测试剂盒(水杨酸比色法)检测原理是在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应生成硝基水杨酸,后者在碱性条件下呈黄色,其颜色深浅与氮含量在一定范围内呈正比,以分光光度计或酶标仪测定410nm处吸光度,根据NO3-的标准曲线即可计算出样品的硝态氮含量,该试剂盒主要用于测定植物组织中的硝态氮含量。
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
ST1465 | 植物硝态氮检测试剂盒 | 反应 | 15元 |
实验流程:
①植物样品:取植物组织1g,清洗干净,擦干,剪碎成1~2mm的碎片,加入10ml蒸馏水,沸水浴中提取30min,取出后用自来水冷却至室温,中速滤纸过滤,补蒸馏水至10ml,即为硝态氮提取液。
②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,用于硝态氮的检测。
③高活性样品:如果样品中含有较高浓度的硝态氮,可以使用硝态氮裂解液或蒸馏水等进行恰当的稀释后再行测定。
1、 配制水杨酸工作液:按水杨酸:浓硫酸=1g:20ml的比例,把水杨酸溶解于浓硫酸,4℃避光保存
2、 配制NO3- Assay Buffer(1×):用蒸馏水将NO3- Assay Buffer(2×)稀释一倍即可。
3、 配制系列NO3-标准溶液:取NO3-标准(200μg/ml)按下表加蒸馏水稀释:
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
NO3-标准(200μg/ml) | 0.05 | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 | 0.6 |
蒸馏水 | 0.95 | 0.9 | 0.8 | 0.7 | 0.6 | 0.5 | 0.4 |
NO3-浓度(μg/ml) | 10 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 | 120 |
4、 NO3-加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
蒸馏水 | 0.02 | — | — |
系列NO3-标准(1~7号管) | — | 0.02 | — |
待测样品 | — | — | 0.02 |
水杨酸工作液 | 0.08 | 0.08 | 0.08 |
混匀,室温放置20min,慢慢加入NO3- Assay Buffer(1×)。 | |||
NO3- Assay Buffer(1×) | 1.9 | 1.9 | 1.9 |
5、NO3-测定:冷却至室温,以空白管调零,分光光度计(1cm光径比色杯)或酶标仪测定标准管、测定管410nm处吸光度(记为A标准、A测定)。
实验结果:
全自动生化仪检测后导出结果,结果由EXCEL形式发送。
送样运输要求:
1、动植物组织样本(干冰运输)
准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。
2、血清样本(干冰运输)
全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜(GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清)后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
3、血浆样本(干冰运输)
可用肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
4、细胞样本
贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。
仅供科研用途,不可用于临床诊断!