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淀粉酶(AMS)(检测服务)

淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)其检测原理是血清或血浆等样品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等,碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝色复合物,其蓝色深浅与未经酶促反应的空白比较,可计算出淀粉酶的活力单位,通过分光光度计检测660nm处吸光度,可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的淀粉酶活性。

价格:¥15.00

规格:反应

货号:ST1450

品牌:LEAGENE

服务介绍:

       淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)其检测原理是血清或血浆等样品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等,碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝色复合物,其蓝色深浅与未经酶促反应的空白比较,可计算出淀粉酶的活力单位,通过分光光度计检测660nm处吸光度,可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的淀粉酶活性。

货号

名称

规格

价格

ST1450

淀粉酶(AMS)检测试剂盒

反应

15

实验流程:

1、 准备样品:

①细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-20℃冻存,用于AMS的检测。

②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水5~10倍稀释后可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常用生理盐水10~20倍稀释后直接用于测定,-20℃冻存,但为了消除样品本身颜色的干扰,需设置加了样品但不加底物的对照。

③高活性样品:如果样品中含有较高活性的AMS,可使用生理盐水或PBS等进行稀释。

④样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度(mg/ml),以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的AMS含量。

2、 AMS加样:按照下表设置空白管、测定管,溶液应按照顺序依次加入

加入物(ml)

测定管

空白管

AMS Assay Buffer

0.5

0.5

37℃孵育5min。

待测样品

0.1

混匀,置于37℃水浴,准确孵育7.5min。

KI工作液

0.5

0.5

蒸馏水

3.0

3.1

      3、 AMS测定:轻轻混匀,蒸馏水调零,分光光度计(比色杯光径1cm)测定660nm处吸光度(记为A测定和A空白)。

实验结果:

全自动生化仪检测后导出结果,结果由EXCEL形式发送。

送样运输要求:

1、动植物组织样本(干冰运输)

准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜(GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清)后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

3、血浆样本(干冰运输)

可用肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。

4、细胞样本

贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。

细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。

 仅供科研用途,不可用于临床诊断!