淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)其检测原理是血清或血浆等样品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等,碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝色复合物,其蓝色深浅与未经酶促反应的空白比较,可计算出淀粉酶的活力单位,通过分光光度计检测660nm处吸光度,可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的淀粉酶活性。
价格:¥15.00
规格:反应
货号:ST1450
品牌:LEAGENE
服务介绍:
淀粉酶(AMS)检测试剂盒(碘-淀粉比色法)其检测原理是血清或血浆等样品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等,碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝色复合物,其蓝色深浅与未经酶促反应的空白比较,可计算出淀粉酶的活力单位,通过分光光度计检测660nm处吸光度,可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的淀粉酶活性。
货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
ST1450 | 淀粉酶(AMS)检测试剂盒 | 反应 | 15元 |
实验流程:
1、 准备样品:
①细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-20℃冻存,用于AMS的检测。
②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水5~10倍稀释后可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常用生理盐水10~20倍稀释后直接用于测定,-20℃冻存,但为了消除样品本身颜色的干扰,需设置加了样品但不加底物的对照。
③高活性样品:如果样品中含有较高活性的AMS,可使用生理盐水或PBS等进行稀释。
④样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度(mg/ml),以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的AMS含量。
2、 AMS加样:按照下表设置空白管、测定管,溶液应按照顺序依次加入
加入物(ml) | 测定管 | 空白管 |
AMS Assay Buffer | 0.5 | 0.5 |
37℃孵育5min。 | ||
待测样品 | 0.1 | — |
混匀,置于37℃水浴,准确孵育7.5min。 | ||
KI工作液 | 0.5 | 0.5 |
蒸馏水 | 3.0 | 3.1 |
3、 AMS测定:轻轻混匀,蒸馏水调零,分光光度计(比色杯光径1cm)测定660nm处吸光度(记为A测定和A空白)。
实验结果:
全自动生化仪检测后导出结果,结果由EXCEL形式发送。
送样运输要求:
1、动植物组织样本(干冰运输)
准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。
2、血清样本(干冰运输)
全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜(GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清)后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
3、血浆样本(干冰运输)
可用肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
4、细胞样本
贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。
仅供科研用途,不可用于临床诊断!