服务介绍：

氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)(Amino Acid Assay kit)检测原理是在弱酸条件下，氨基酸与茚三酮共热情况下能定量的产生蓝紫色的二酮茚胺(又称Ruhemans紫)，其吸收峰在波长570nm处，在一定范围内颜色深浅(即吸光度)与氨基酸浓度成正比，该试剂盒主要用于检测植物组织、血清、尿液、食品、药品等中的总游离氨基酸含量。

实验流程:

1、 准备样品

①植物样品：取新鲜植物组织，称取0.4g，按植物组织：AA Lysis buffer(1×)=0.4g：2.0ml的比例加入AA Lysis buffer(1×)匀浆或研磨，用无氨蒸馏水稀释至40ml，混匀，

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，

③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如有必要用AA Lysis buffer(1×)进行匀浆，1000g离心5min，留取上清即为氨基酸粗提液

④高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的氨基酸，可以使用AA Lysis buffer(1×)进行恰当的稀释。

2、配制茚三酮显色液: 取0.3g茚三酮，溶解于50ml茚三酮稀释液，搅拌或超声处理至完全溶解，即为茚三酮显色液。

3、配制茚三酮工作液: 取适量的茚三酮显色液、AA Assay buffer，按茚三酮显色液：AA Assay buffer=35：3的比例混合，即为茚三酮工作液

4、配制维生素C工作液: 取出1支维生素C，准确溶解于30ml无氨蒸馏水，混匀

5、配制系列氨基酸标准溶液：取出氨基酸标准(50μg/ml)恢复至室温，用无氨蒸馏水将其稀释至10μg/ml，然后按下表继续稀释：

6、AA加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入

 7、AA测定：加60%乙醇2.1ml，混匀；立即以空白调零，分光光度计(比色杯光径1cm)测定标准管、测定管570nm处吸光度(记为A_标准、A_测定)。

 实验结果：

全自动生化仪检测后导出结果，结果由EXCEL形式发送。

送样运输要求：

1、动植物组织样本(干冰运输)

准确称取动物组织重量按重量(mg)：体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水)，冰水浴条件下，机械匀浆，制备成10%的匀浆液，2500~3000转/分钟，离心10分钟，取上清液进行测定。

2、血清样本(干冰运输)

全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜（GLU检测请勿全血样本放置过夜取血清）后于2-8℃ 3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

3、血浆样本(干冰运输)

可用肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min，取上清即可立即检测;或进行分装，并将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心，然后检测。

4、细胞样本

贴壁细胞：将细胞用PBS冲洗2次后，用细胞刮将细胞小心刮下来，将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

悬浮细胞：将培养液3000转/分，离心10min。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

细胞上清：标本于2-8℃，3000转/分离心15min取上清，上清立即用于实验，或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！