蛋白质分子中存在含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸,使蛋白质在270~290nm波长范围内具有吸收紫外光的性质,其中酪氨酸的最大吸收峰为275nm,色氨酸的最大吸收峰为280nm,苯丙氨酸的最大吸收峰为257nm,在上述波长范围内蛋白质溶液的吸收值与其浓度呈正比,可作定量测定。
Leagene紫外法蛋白定量试剂盒优点是:操作迅速、简便,不易受低浓度盐类的干扰;缺点是与标准蛋白中酪氨酸、色氨酸含量差异较大的蛋白质,准确性较差,样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸会干扰检测结果,常用的紫外法测蛋白浓度的方法有标准曲线法、280nm与260nm吸收差法(Lowry-Kalckar法或Warburg-Christian法)、215nm与225nm吸收差法(Waddell法)和肽键测定法等方法。该试剂仅用于科研领域,不适用临床诊断或其他用途。