双缩脲反应的原理是尿素加热形成氨气和双缩脲，在呈碱性条件下，铜离子与双缩脲结合形成红紫色的络合物，此反应成为双缩脲反应。蛋白质分子中含有肽键与双缩脲结构相似，故能发生此反应。因所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例，可定性或定量分析蛋白质浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。
Leagene双缩脲试剂(AB液)由Biuret Reagent A、Biuret Reagent B组成，主要试剂为氢氧化钠和硫酸铜。如果组织中含有蛋白质或具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应，颜色深浅与蛋白质浓度成正比，该试剂是较为粗略的验证蛋白质存在的方法，多用于定性检测蛋白质。该试剂仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
