蛋白提取与检测

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PT0055

福林酚试剂(B,1M)

用途:又叫福林酚试液乙液、Folin-酚试剂B液,酸度为1M,无需稀释,可直接使用。用于定量测定蛋白质浓度。

储存条件:室温,避光,12个月

产品规格价格(元)
50ml¥48
100ml¥85
500ml¥250

Leagene福林酚试剂(B,1M)英文名称为Folin & Ciocalteu's Phenol Reagent,即福林酚试剂盒中的试剂B,也就是福林酚II液或福林酚乙液。本产品采用钨酸钠、钼酸钠、磷酸、盐酸等按一定比例加热回流后加入硫酸锂精制而成。本品为澄清的淡黄(绿)色到深黄(绿)色的即用型试剂,浓度为1N或1mol/L,是2N高浓度福林酚试剂浓度的一半,请根据实验需要直接使用或适当稀释。本品不含苯酚,但可与酚类、非酚类还原物质发生反应,形成比色法可检测的发光原。常用于Lowry法测定蛋白浓度,也用于多肽、多酚、酪氨酸和菠萝蛋白酶等的定量测定。

蛋白浓度测定有多种方法,如BCA法、Bradford法、Lowry法和双缩脲法等。Lowry法,又名Folin-Phenol法,操作简单,为蛋白质测定最经典的高灵敏度方法之一。Lowry法检测原理与双缩脲法相同,但前者在后者的基础上加入了福林酚试剂,极大地增加了显色量,从而显著提高了检测灵敏度。

Lowry法检测的基本原理如下:蛋白质分子含有与双缩脲相似的肽键,在碱性条件下,与铜离子反应,结合生成蛋白质-铜络合物。加入福林酚试剂后,试剂中的磷钼酸盐-磷钨酸盐被蛋白质-铜络合物所含的酪氨酸和色氨酸等还原,形成深蓝色磷钼蓝和磷钨蓝混合物,产生550-750nm之间提高吸光度的色原体,颜色深浅与蛋白质浓度成正比,故可用比色的方法测定蛋白质的含量。在不存在铜离子的情况下,颜色深浅主要取决于蛋白质中酪氨酸和色氨酸的含量,在较小程度上由半胱氨酸和组氨酸决定。铜离子对酪氨酸、色氨酸或组氨酸的颜色形成没有影响,但会减少半胱氨酸导致的颜色形成。一般情况下,750nm或660nm处的吸光度用于定量较低的蛋白质浓度,而550nm处的吸光度用于定量更高的蛋白质浓度。

成品有腐蚀性,应避免接触皮肤、粘膜等;试剂颜色变为墨绿色时应弃用。该产品仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。